Купить Азур-эозин по Романовскому Р-КЛАССИК (для КЛАССИЧЕСКОЙ окраски препаратов крови) в Санкт-Петербурге,

продажа Азур-эозин по Романовскому Р-КЛАССИК (для КЛАССИЧЕСКОЙ окраски препаратов крови) (Azur-eosin according to Romanovsky GEMSTANDART-R-KLASSIK (CLASSICAL staining of blood)) в Санкт-Петербурге - растворы для микробиологии, микробиология микробиология. Области применения Азур-эозин по Романовскому Р-КЛАССИК (для КЛАССИЧЕСКОЙ окраски препаратов крови):

• (КЛАССИЧЕСКИЙ) - Краситель азур-эозин по Романовскому (Гимзе) для КЛАССИЧЕСКОЙ окраски форменных элементов крови.
• 1 литр раствора позволяет окрашивать до 5000 препаратов.
• Рабочий раствор сохраняет свои свойства 6-8 часов.
• При фиксации и окраске рекомендуется использовать Фиксатор-краситель по Май-Грюнвальду "МГ" или Фиксатор-краситель типа Лейшмана "Л".

ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ КРАСИТЕЛЯ АЗУР-ЭОЗИН ПО РОМАНОВСКОМУ

Назначение

Краситель в растворе, далее по тексту - краситель, предназначен для применения в качестве красителя форменных элементов крови.

Состав

Краситель представляет собой 0,76% раствор сухого красителя азур-эозин по Романовскому (Гимза азур-эозин метиленовый синий) в смеси метанола и глицерина (1:1) - 1 флакон (1 л).

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

В состав красителя входит метанол - яд, класс опасности III, особенности действия на организм А, токсичен при ингаляции, контакте с кожными покровами и особенно при проглатывании. Огнеопасен. Концентрация паров метанола в производственных помещениях при использовании и испытании красителя не должна превышать ПДК = 5 мг/м3.

Работа с красителем должна проводиться в вытяжном шкафу при хорошо действующей вентиляции, в перчатках, вдали от открытого огня.

Меры предосторожности - соблюдение “Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарноэпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР”

При работе с красителем следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита В или любой другой возбудитель вирусной инфекции. 

Химическая посуда и оборудование, используемые при работе с красителем, должны быть соответствующим образом маркированы и храниться отдельно.

Запрещаются хранение и прием пищи и курение в помещениях, предназначенных для работы с красителем.

ОБОРУДОВАНИЕ, МАТЕРИАЛЫ, РЕАКТИВЫ:

ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ

ПРИГОТОВЛЕНИЕ НЕЙТРАЛИЗОВАННОЙ ВОДЫ

Взвесить на аналитических весах с точностью до 0,01 г 9,50 г натрия фосфорнокислого двузамещенного безводного или 22,70 г натрия фосфорнокислого двузамещенного 12-водного; навеску перенести в мерный цилиндр вместимостью 1000 мл, добавить 900 мл дистиллированной воды, перемешать до растворения, довести до 1000 мл дистиллированной водой и тщательно перемешать (раствор 1). Взвесить на аналитических весах с точностью до 0,01 г 9,07 г калия фосфорнокислого однозамещенного; навеску внести в мерный цилиндр вместимостью 1000 мл, добавить 900 мл дистиллированной воды, перемешать до растворения, довести до 1000 мл дистиллированной водой и тщательно перемешать (раствор 2).

Внести в мерный цилиндр вместимостью 1000 мл 63 мл раствора 1 и 37 мл раствора 2, довести до 1000 мл дистиллированной водой и определить рН полученной нейтрализованной воды на рН-метре; рН должен находиться в диапазоне 6,8 - 7,2.

Полученную нейтрализованную воду можно хранить при комнатной температуре (+18 - 25°С).

ПРИГОТОВЛЕНИЕ МАЗКОВ КРОВИ

Мазки крови сделать на предметных стеклах с помощью более узкого предметного шлифованного стекла следующим образом.

Взять предметное стекло за длинные края и прикоснуться его поверхностью, отступив на 0,5 - 1 см от узкого края, к капле крови (но не к коже). Предметное стекло следует держать на столе или в левой руке за края. Правой рукой приставить шлифованное стекло узким краем к предметному стеклу с кровью слева от капли под углом 45° и продвинуть его вправо до соприкосновения с каплей крови.

Выждать до тех пор, пока кровь расплывется по всему ребру шлифованного стекла, и затем легким быстрым движением провести его справа налево до тех пор, пока не будет исчерпана вся капля. Капля крови должна быть небольшой и соразмерна так, чтобы весь мазок помещался на предметном стекле, не доходя 1 - 1,5 см до его края. Сильно нажимать на стекло нельзя, так как многие клетки крови могут оказаться поврежденными. Хорошо сделанный мазок тонок, имеет желтоватый цвет и оканчивается “метелочкой”.

После приготовления мазки следует быстро высушить на воздухе до исчезновения влажного блеска; при медленном высыхании может изменяться морфология клеток. Затем мазки надо зафиксировать метанолом или раствором фиксатора-красителя по Май-Грюнвальду или типа Лейшмана в течение 3-5 мин. При фиксации мазков фиксатором-красителем препараты после окончания фиксации следует ополоснуть в нейтрализованной воде. Уложить препараты мазками кверху на стеклянный мостик для окраски.

ПРОВЕДЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Непосредственно перед определением приготовить рабочий раствор красителя: смешать раствор красителя с нейтрализованной водой в соотношении 1:10 - 1:20 и профильтровать. |
Полученный рабочий раствор красителя можно хранить в течение 6 часов.
На фиксированные мазки крови налить рабочий раствор красителя, по истечении 15 - 45 мин препараты промыть нейтрализованной водой, высушить на воздухе и микроскопировать при увеличении 6,3×100/1,30 или аналогичном.

Окраска форменных элементов крови должна быть следующей:

• эритроциты - розовые, розовые с серым или бежевым оттенком, бежево-коричневые;
• тромбоциты - розово-фиолетовые или фиолетовые;
• ядра лимфоцитов, моноцитов и нейтрофилов - фиолетовые; цитоплазма лимфоцитов - голубая, серо-голубая или сине-голубая;
• цитоплазма моноцитов - серо-голубая; цитоплазма нейтрофилов - бледно-розовая или розово-серая;
• зернистость нейтрофилов - фиолетовая или красно-фиолетовая;
• зернистость эозинофилов - оранжево-красная, розово-красная или розовофиолетовая;
• зернистость базофилов — фиолетовая.

УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ

• Хранение красителя должно проводиться при температуре от 0°С до +25°С в крытых вентилируемых помещениях вдали от кислот и щелочей, не допуская воздействия прямых солнечных лучей, в течение всего срока годности (1 год).
• Краситель стабилен после вскрытия флакона в течение всего срока годности при условии достаточной герметизации флакона.
• Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по применению красителя.

СВЕДЕНИЕ ОБ УНИЧТОЖЕНИИ

Уничтожать неиспользованный при исследованиях фиксатор-краситель и другие реактивы следует в соответствии с СП 2.1.7.1386 и СанПиН 2.1.7.2790 как отходы класса Б; указания к работам по дезинфекции оборудования и помещений – по ОСТ 42-21-2 и МУ 287-113.

Окрашивание по Романовскому — Гимзе / Romanovsky - Giemsa staining

Окрашивание по Романовскому — Гимзе — цитологический метод окрашивания микроорганизмов, клеточных структур и тканей различных видов (в том числе крови) для изучения методом световой микроскопии. Предложена в 1904 году Густавом Гимзой. В авторской версии название красителя — «Giemsasche Lösung für die Romanowsky Färbung» (Раствор Гимзы для окраски по Романовскому). Окрашивает ацидофильные образования в различные оттенки красного цвета, базофильные — в цвета от пурпурного до синего.

Приготовление красителя / Preparation of the dye

Готовый жидкий краситель перед окрашиванием мазков разводят из расчёта 1—2 капли красителя на 1 мл дистиллированной воды. Мазки окрашивают 20—25 минут при 37 °C во влажной камере (закрытая чашка Петри с увлажнённым фильтром на дне). После окрашивания мазки промывают в проточной воде, сушат на воздухе и исследуют при масляной иммерсии.

Красящую смесь Романовского-Гимзы, которая имеет в основе краску Романовского-Райта, в виде порошка (коммерческий краситель) растворяют в смеси равных объёмов метилового спирта и глицерина (800 мг красителя на 100 мл растворителя). Краситель растворяется плохо, поэтому лучше его растереть с растворителем в количестве 300 мг на 100 мл, а затем, помешивая, добавлять краситель до получения нужной концентрации. Приготовление красителя часто занимает несколько дней. Важно в качестве растворителей использовать химически чистый метиловый спирт и глицерин, так как примеси ухудшают свойства красителя. Вместо метилового спирта можно применять 100 % этиловый спирт. Приготовленную красящую смесь хранят в сухом прохладном месте в плотно закрытом сосуде.

Специальный стандартный раствор Гимза / Special standard solution Giemsa

Состав красителя раствор Гимза (The composition of the dye solution Giemsa):

Методика окраски, краситель форменных элементов крови, краситель для гематологии / Coloring technique, dye of blood cells, dye for hematology

Мазки, фиксированные в метиловом спирте, окрашивают раствором (1 мл готовой жидкой краски + 2 мл основного буферного раствора + 47 мл дистиллированной воды) в течение 40—120 мин (продолжительность окрашивания подбирают эмпирически). Пользуются фосфатным буфером, но рН буфера зависит от вида мазка: для мазка костного мозга — 5,8—6,0, для мазка крови — 6,4—6,5, для выявления простейших — 6,8, малярийного плазмодия — 7,0—7,2.

Ополаскивают в дистиллированной воде, высушивают и исследуют при иммерсии.

Результат окраски форменных элементов крови, краситель для гематологии / The result of staining blood cells, dye for hematology

Бактерии окрашиваются в фиолетово-красный цвет, цитоплазма клеток — в голубой, ядра — в красный. При окрашивании простейших их цитоплазма приобретает голубой цвет, а ядра — красно-фиолетовый.

Результаты окрашивания мазков крови, форменных элементов крови / The results of staining of blood smears, blood cells